Evaluation of a novel rapid diagnostic test for Schistosoma haematobium based on the detection of human immunoglobulins bound to filtered Schistosoma haematobium eggs

Objectives To determine whether the detection of human IgG bound to Schistosoma haematobium eggs from filtered urine could be used as a rapid diagnostic test (RDT-Sh). Methods We filtered 160 urine samples from children in the Kwale District of Kenya to isolate S.haematobium eggs and used anti-human IgG antibody conjugated to horseradish peroxidase to bind to the human IgG attached to the eggs. We then added 3,35,5-tetramethylbenzidine base (TMB), which turns blue in the presence of horseradish peroxidase to detect the S.haematobium eggs. The RDT-Sh was compared in a blinded manner to urine microscopy. Results The RDT-Sh was positive in 89% of urine samples containing >1 egg/10ml (58/65 samples) and 97% of urine samples containing >11 eggs/10ml urine (35/36 samples) seen by microscopy. The RDT-Sh was negative 79% of the time when no eggs were seen on urine microscopy, but because up to three times more urine was used for the RDT-Sh, there were likely cases in which eggs were on the RDT-Sh filter but not detected by microscopy. We used latent class analysis incorporating urine microscopy, haematuria, proteinuria and RDT-Sh results to determine an overall 97% sensitivity and 78% specificity for RDT-Sh, 96% and 81% for urine microscopy, 71% and 98% for microscopic haematuria and 46% and 89% for proteinuria, respectively. Conclusions The RDT-Sh is quick, inexpensive and easy to perform in the field for the diagnosis of S.haematobium. Objectifs Determiner si la detection d'IgG humaines fixees aux OEufs de Schistosoma haematobium, a partir d'urine filtree peut etre utilisee comme un test de diagnostic rapide (RDT-Sh). Methodes Nous avons filtre 160 echantillons d'urine d'enfants dans le district de Kwale au Kenya pour isoler les OEufs de S.haematobium et avons utilise des anticorps IgG humains conjugues a la peroxydase de raifort pour les fixer aux IgG humaines attachees aux OEufs. Nous avons ensuite ajoute du 3,35,5-tetramethylbenzidine base (TMB), qui vire au bleu en presence de la peroxydase de raifort, pour detecter les OEufs de S.haematobium. Le test RDT-Sh a ete compare a l'aveugle a la microscopie d'urine. Resultats Le test RDT-Sh a ete positif dans 89% des echantillons d'urine contenant >1OEuf/10ml (58/65 echantillons) et dans 97% des echantillons d'urine contenant >11OEufs/10ml d'urine (35/36 echantillons) vus par la microscopie. Le test RDT-Sh a ete negatif dans 79% des cas oU des OEufs n'ont pas ete observes par la microscopie d'urine, mais parce qu'une quantite jusqu'a trois fois plus d'urine a ete utilisee dans le test RDT-Sh, il y a eu des cas probables oU des OEufs etaient sur le filtre RDT-Sh mais n'ont pas ete detectes par la microscopie. Nous avons utilise l'analyse de classe latente incorporant les resultats de la microscopique des urines, d'hematurie, de proteinurie et du test RDT-Sh pour determiner une sensibilite globale de 97% et une specificite de 78% pour le test RDT-Sh, 96% et 81% pour la microscopie d'urine, 71% et 98% pour l'hematurie microscopique et 46% et 89% pour la proteinurie, respectivement. Conclusions Le test RDT-Sh est rapide, peu couteux et facile a realiser dans le domaine du diagnostic de S.haematobium. Objetivos Determinar si la deteccion de la IgG humana, unida a huevos de Schistosoma haematobium filtrados de muestras de orina, puede utilizarse como una prueba diagnostica rapida (PDR-Sh). Metodos Filtramos 160 muestras de orina de ninos del distrito de Kwale, en Kenia, para aislar los huevos de S. haematobium y utilizamos anticuerpos anti-IgG humana, conjugados con peroxidasa del rabano, para que se uniesen a la IgG humana unida a los huevos. Despues anadimos 3,35,5-tetrametilbenzidina base (TMB), que se transforma en azul en presencia de la peroxidasa del rabano para detectar los huevos de S.haematobium. La PDR-Sh se comparo de en un ensayo ciego con la microscopia de la orina. Resultados La PDR-Sh fue positiva en un 89% de las muestras de orina que contenian >1huevo/10ml (58/65 muestras) y un 97% de las muestras de orina contenian >11huevos/10ml orina (35/36 muestras) observadas mediante microscopia. La PDR-Sh fue negativa en un 79% de las veces en las que no se observaban huevos mediante microscopia, pero debido a que se utilizo tres veces mas orina para la PDR-Sh, podria haber casos en los que los huevos estaban en el filtro de la PDR-Sh, pero que no se detectaron mediante microscopia. Utilizamos un analisis de clases latentes incorporando los resultados de la observacion por microscopia de la orina, la hematuria, la proteinuria y del PDR-Sh, y se determino una sensibilidad total del 97% y una especificidad del 78% para la PDR -Sh, 96% y 81% para la microscopia de la orina, 71% y 98% para la microscopia de hematuria, y 46% y 89% para la proteinuria, respectivamente. Conclusiones La PDR-Sh es rapida, barata y facil de realizar en el campo para el diagnostico de S.haematobium.